1.1.1儀器
呼吸防護用品細菌過濾效率(BFE)黄色网站APP草莓、高壓蒸汽滅菌器、電子天平、生化培養箱、超淨工作台、菌落計數儀。
1.1.2試劑及材料
蒸餾水、75%消毒酒精、胰蛋白酶大豆瓊脂(TSA)、胰蛋白腖大豆肉湯培養基(TSB)、蛋白腖、酒精燈、90mm培養皿、500mL錐形瓶。
細菌懸浮液製備
培養基配置
取500mL錐形瓶,按照要求精確稱取一定量的TSA培養基,加入合適比例的蒸餾水,包紮後放入高壓蒸汽滅菌器,121°C滅菌15min,滅菌結束後取出,待其冷卻至約50°C時,將培養基逐個倒入無菌培養皿中,操作應在超淨工作台中進行,以酒精燈的火焰周圍作為無菌區域,避免雜菌汙染,每個培養皿中應倒入約27mL培養基。
無菌確認
待培養基冷卻凝固後,將其倒置放入恒溫培養箱中,37°C條件下培養24h,將有菌落生長的培養皿舍棄不用,無雜菌生長的取出備用。
細菌懸浮液製備
挑取一環金黃色葡萄球菌ATCC6538接種在適量胰蛋白腖大豆肉湯培養基中,在(37±2)°C振蕩培養(24±2)h,然後用1.5%的蛋白腖將上述培養物稀釋至約5×105cfu/ml。
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